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L’elettroforesi corsa

Fare riferimento alle note, tamponi, e la sezione

dei volumi per ulteriori informazioni.



Raffreddare la base prima dell’uso, soprattutto se

valori più alti di tensione sarà utilizzato o durante la

separazione richiederà più di 30 minuti.

Nota: Per monitorare il progresso di separazione, o

aggiungere 0,5 µg/ml (conc ﬁnale). Di bromuro di

etidio al tampone di corsa ora, o aggiungere 50 µg/ml

(conc ﬁnale.) Bromuro di etidio al tampone campione.

Per visualizzare i propri progressi, spegnere l’alimen-

tazione, rimuovere il gruppo coperchio, e tenere una

lampada portatile UV vicino al gel.

L’aggiunta di bromuro di etidio al tampone di corsa

o del campione rallenta la migrazione leggermente.

Rilevamento con questo metodo non è sensibile come

la colorazione e la visualizzazione su un transillumina-

tore. (Vedi la rilevazione del DNA, pagina 15.)



Riempite entrambe le camere del buffer con tampone

di corsa ﬁno a quando il buffer è ~1 mm di profondità

nel gel. (Questa operazione richiede circa 220 ml.)



Caricare i campioni. Aggiungere il campione al buffer

5X caricamento del campione e mescolare (1/5 del

volume ﬁnale è tampone di caricamento, vedere pagi-

na 14). Utilizzare una micro-pipetta per caricare ogni

campione, avendo cura di evitare la puntura del fondo

del pozzetto o intrappolare eventuali bolle.



Posizionare il coperchio in modo che il catodo (–)

cavo nero è più vicina alla ﬁne del pozzetto. (Cam-

pioni di acido nucleico migrano verso l’anodo (+)

cavo rosso. Collegare i cavi colorati (rosso con rosso e

nero con nero) ad un alimentatore approvato, come il

PS300B. Impostare il livello di tensione e timer (se

disponibile) secondo il grado di risoluzione richiesta.

Attenzione: il bromuro di

etidio è un agente mutageno

conosciuto. Indossare sempre

guanti durante la manipolazione.

Indossare occhiali di protezione

UV e proteggono la pelle quando

si usa una lampada UV.

Nota: Se non colorante è stato

aggiunto al liquido refrigerante,

posizionare la base su uno

sfondo scuro per vedere i

pozzetti più facilmente.

Nota: al valore massimo l’unità

inizia il surriscaldamento non

appena la base raffreddata

raggiunge la temperatura

ambiente. Se il surriscaldamento

non è controllata, il gel si

scioglie e/o la base dell’unità

deformare!

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